樟薄孔菌菌丝体醇溶组分分析及其抗菌活性的研究

以探索樟薄孔菌抗菌活性为目的,采用液体深层发酵的方法获取樟薄孔菌菌丝体,以乙醇提取其醇溶性组分。用气相色谱-质谱联用技术结合红外光谱对醇溶组分进行鉴定,对其进行植物病原菌和医学病原菌的抗菌试验。结果表明,醇溶组分主要含有顺十二碳-10-烯酸四氢吡喃酯、5-己基-α-呋喃酮、Z,Z-十八碳-9,12-二烯酸、十八碳-9,12-二烯酸乙酯、十八碳-9-烯酸乙酯、1-(2,6,6-三甲基-环己烯基)-1-十一烯-3,6-二酮、邻苯二甲酸-α-乙基己酯、2,6-二氨基-3-(4-氨基-6-喹啉偶氮基)吡啶8种化学成分。对醇溶组分进行植物病原菌和医学病原菌的抗菌试验,结果表明,樟薄孔菌醇溶组分对苹果腐烂病菌、葡萄黑痘病菌、棉花枯萎病菌、小麦赤霉病菌和大肠杆菌病原菌表现出较强的抑制生长作用。     

树舌灵芝多糖的制备及除草活性研究

为了得到天然无毒的生物农药,研究了不同浓度树舌灵芝发酵液粗多糖的除草活性。以生菜、夏至草、小麦和稗草为受体植物,采用琼脂混粉法进行了室内除草活性的测定。结果表明,树舌灵芝多糖对各受体植物胚根表现出明显抑制作用,且抑制作用随多糖浓度增加而增大,除夏至草外对胚轴均表现出促进作用。     

樟芝胶囊生产工艺中发酵液与醇沉多糖中腺苷含量的测定

利用高效液相色谱法建立了樟芝胶囊生产工艺中发酵液与醇沉多糖中腺苷含量的测定方法。采用色谱柱Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),磷酸盐缓冲溶液(pH 6.47)-甲醇(90∶10)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长260 nm,柱温为室温。结果表明,腺苷的线性方程为Y=29160X-4972,在1.17～37.5 mg/L范围内线性关系良好,r=0.9999。平均回收率为102.8%,RSD=1.29%。本方法简单、快速、准确,可作为樟芝胶囊生产过程中腺苷含量测定的一种有效方法。     

蓝莓叶斑病病原菌鉴定及其生物学特性

为明确山东省蓝莓叶斑病病原菌的种类及其生物学特性,采用组织分离法获得菌株B1,通过形态学特征并结合r DNA-ITS序列分析对该菌株B1进行鉴定,以离体和活体叶片接种法测定菌株B1的致病性,并对其生物学特性进行研究。结果表明,菌株B1菌落呈白色绒毛状,背面淡黄色,分生孢子纺锤形,5个细胞,中间3个细胞为褐色,具有2～4根顶端附属丝;菌株B1的ITS序列与GenBank中棒状拟盘多毛孢Pestalotiopsis clavispora的相似性达99%以上,结合形态特征与rDNAITS序列分析将病原菌鉴定为棒状拟盘多毛孢,GenBank登录号为MG009201。菌株B1接种蓝莓叶片后产生褐色病斑,后期密生黑色分生孢子盘,与蓝莓田间自然发病症状一致。该菌株在5～35℃、pH 5～11范围内均可生长,最适温度范围为25～30℃,最适pH范围为5～9;但仅在25～30℃时产生分生孢子,最适产孢温度为25℃;光照条件对菌丝生长无明显影响,但连续黑暗有利于产孢;以葡萄糖为碳源时利用率最高,对乳糖利用效果最差;最适氮源为硝酸钠、硫酸铵和蛋白胨,几乎不能利用尿素。     

樟芝发酵液醇溶酸性组分分析及抗菌活性研究

采用液体深层发酵的方法获得樟芝发酵全液,以乙醇、酸化萃取手段获得发酵全液醇溶酸性组分ESAC,用气相色谱-质谱联用技术结合红外光谱对醇溶酸性组分进行鉴定,对樟芝醇溶酸性组分进行植物病原菌和医学病原菌的抗茵试验。结果表明,醇溶酸性组分主要含有5-氧-四氢呋喃-2-甲酸、苯乙酸、4-羟基苯乙醇、2,4-二羟基苯基乙基酮、3-甲基-2,4-二羟基乙酰苯、2,3,4-三氟苯甲酸异丙酯、5,7,8-三甲基-6-氧杂萘邻酮基乙酸酯、顺-10-十二碳烯酸四氢吡喃酯。ESAC对金黄色葡萄球菌的抑制效果最强。     

臭氧水对番茄根结线虫病的防治效果

试验采用盆栽定量接种法和温室分区处理试验测定了番茄定植前臭氧水浇灌处理对南方根结线虫的防治效果。室内盆栽试验结果表明:随着臭氧水浇灌处理次数的增加,根结线虫防治效果和番茄生长促进作用呈上升趋势;与对照相比,0.5 mg/kg臭氧水浇灌处理5次对根结线虫的相对防效较好,为65.1%,番茄株高和地上部鲜质量增长率分别为60.2%和108.2%。温室分区处理试验结果表明:1.0mg/kg臭氧水浇灌处理4次,对番茄根结线虫病的相对防效为72.1%,达到熏蒸性杀线虫剂异硫氰酸甲酯相对防效的90%。     

菌株S01324对燕麦孢囊线虫的杀线活性及其种类鉴定

 燕麦孢囊线虫是我国小麦孢囊线虫病的重要病原之一,为寻找适宜的生防菌株,本研究通过室内生测、室内杯栽试验以及田间管栽试验对菌株S01324的菌体和发酵滤液进行了杀线虫活性测定。室内生测结果发现,菌株S01324对孢囊的寄生率达到100.0%;处理8 d后,菌株发酵滤液原液对卵孵化的抑制率为98.8%,发酵滤液稀释16倍对卵孵化的抑制率仍能达到42.0%;处理24 h后发酵滤液原液对二龄幼虫(J2)的校正死亡率达到100.0%,而处理6 d后发酵滤液8倍稀释液也能杀死全部J2。杯栽试验发现,发酵滤液原液和麦粒培养物处理后,孢囊减少率分别为50.6%和62.1%。管栽试验发现,发酵滤液原液和麦粒培养物处理后,孢囊减少率分别为60.8%和58.9%。通过形态学和序列分析,菌株S01324鉴定为绳状青霉(Penicillium funiculosum)。这是关于绳状青霉杀线活性的首次报道。